• 药效和毒理研究

    体外药理学

    长控自动化提供全面的体外药物功能性评估服务，，涵盖广泛的治疗性药物，，，，包括抗体、、、抗体药物偶联物 (ADCs)、、CAR-T细胞治疗、、、、小分子、、溶瘤病毒等。。我们采用先进技术，，，，如流式细胞术、、、ELISA、、、、HTRF和Incucyte活细胞成像进行评估。。
    In Vitro Pharmacology

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      体外药理服务

      长控自动化提供了全面的体外细胞功能评价服务。。。。利用原代细胞和细胞系，，，通过流式细胞术、、、、ELISA、、HTRF、、、Incucyte细胞成像等实验技术，，，，对候选抗体的结合能力，，，，Fc相关功能特性，，，Fab相关功能特性等体外药理学进行检测评价，，为阐释候选抗体药效作用、、、、毒性作用机制以及临床转化研究提供支持。。。。

      体外药理学服务包括以下实验：

      1. 一般实验

      • 结合实验
      • 细胞内信号转导
      • 细胞效应(Fc)(ADCC, ADCP, CDC)
      • 安全性评估

      2. Fab 相关功能实验

      非免疫细胞

      • 内吞作用
      • 细胞增殖
      • 酶活性

      细胞因子

      • 阻断实验
      • 信号转导
      • 抑制/激活

      3. 基于免疫细胞的实验

      • 基于 T 细胞的实验（刺激、、MLR、、杀伤）
      • 基于 B 细胞的实验（刺激）
      • 基于树突状细胞 (DC) 的实验（MLR、、成熟诱导）
      • 基于巨噬细胞的实验（M1/M2 极化、、、靶细胞吞噬作用）
      • 基于 NK 细胞的实验（激活实验、、、杀伤实验）
      体外药理实验平台

      流式细胞术：

      • 每个细胞 24 个生物标志物
      • 生物标志物分析
      • 细胞增殖、、、周期、、、、凋亡
      • 细胞毒性

      IncuCyte：

      • 96 孔板全板扫描仅需 5-10 分钟。。。。
      • 服务覆盖细胞健康与增殖、、、、细胞功能、、、、细胞运动与形态

      细胞因子分析：

      • Meso Scale Discovery(MSD): 高灵敏度，，，宽线性范围，，，高特异性
      • Luminex：最多支持 100 个不同的组分
      Attune NxT with Autosampler 3 Lasers, 11 Colors
      Attune NxT流式细胞仪（3激光，，，，11种颜色）
      IncuCyte S3 live-cell analysis system
      IncuCyte S3 活细胞分析系统
      Cytek NL-CLC with Autosampler 3 Lasers, 24 Colors
      Cytek NL-CLC流式细胞仪（3激光，，24种颜色）
      Luminex 200
      Luminex 200
      Meso Scale Discovery(MSD)
      Meso Scale Discovery(MSD)
      TECAN Fluent automation workstation
      TECAN Fluent自动化工作站
      体外药理研究案例
      单克隆抗体体外检测

      Fc相关功能实验

      • ADCC, ADCP, CDC

      Fab相关功能实验

      • 效应细胞激活
      • 酶活性阻断
      • 靶细胞增殖抑制
      • 吞噬作用
      Fc–related Function Assays
      ADCC实验
      ADCC Assay

      本实验以PBMCs作为效应细胞。。。。以高浓度CFSE标记的Jurkat-h4-1BB细胞为靶细胞，，，，以低浓度CFSE标记的Jurkat WT细胞为对照细胞。。。。这些细胞在不同浓度的抗人4-1BB抗体存在下孵育18小时。。

      细胞毒性百分比=[1 - (对照孔比率 / 实验孔比率)] × 100；比率=CFSElow细胞数/CFSEhigh细胞数。。。。

      通过流式细胞术检测ADCP实验
      ADCP assay by Flow Cytometry

      使用Far Red染料标记巨噬细胞（E），，使用CFSE染料标记Raji细胞（T）。。。。E:T = 1:5。。。添加不同浓度的CD20 IgG1抗体并孵育4小时，，通过流式细胞术检测巨噬细胞的吞噬作用。。

      吞噬指数（PI）=（吞噬的巨噬细胞数量）/（巨噬细胞总数）× 100%

      CDC实验
      CDC Assay

      CD20 IgG1抗体介导的CDC实验。。。。在含有补体的情况下，，，，将Raji细胞与不同浓度的CD20 IgG1抗体混合，，，，并孵育2小时。。通过LDH法检测抗体的细胞毒性效应。。

      Cytotoxicity % = （实验孔LDH值 − 自发释放孔LDH值）/（靶细胞最大LDH释放值 − 自发释放孔LDH值）× 100%

      混合淋巴细胞反应（MLR）
      Mixed lymphocyte reaction (MLR)

      将人CD4+ T细胞与异体树突状细胞以10:1比例在96孔圆底培养板中混合，，，，添加不同浓度的nivolumab（in house），，并在120小时孵育后通过ELISA测定释放的IFN-γ含量。。结果显示，，，，nivolumab（in house）在混合淋巴细胞反应（MLR）中剂量依赖性地增强了IFN-γ和IL-2的产生。。。

      效应细胞激活
      Effector cell activation

      将人PBMC与SEB（10 ng/mL）共同孵育，，，，随后添加不同浓度的ipilimumab或同型对照抗体，，，再进一步孵育48小时。。。。通过ELISA检测IL-2的释放。。。结果显示，，ipilimumab剂量依赖性地增强了SEB刺激的PBMC产生IL-2。。。。

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